无菌实验室日常管理要求-最新皇冠会员网址
为维护无菌实验室的洁净度不受影响,无菌实验室应制定质量管理标准,并设专人负责无菌间的定期环境监测工作相关要求大至如下:
1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间,无菌操作间洁净度应达到10000级,室内温度保持在20-24℃,湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。
2.工作人员进入无菌室前,必须用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在缓冲间更换专用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手),方可进入无菌室进行操作。
3.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上,并且同时打开超净台进行吹风。操作人员进入无菌室应关掉紫外灯;
4.人员进入无菌室要穿无菌衣、帽、口罩和专用鞋,非工作人员不得随意进入;
5.无菌室应备有工作浓度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液等。
6.无菌室内配备紫外灯进行空气消毒,应定期用适宜的消毒液(70%酒精或0.2%新洁尔灭)灭菌清洁,以保证无菌室的洁净度符合要求。
7.无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。每日进行湿式小扫除,每周进行大扫除,每月进行空气和实验台表面的细菌学检测,各项指标控制在最低标准,符合无菌室的技术要求。
8.严防一切灭菌器材和培养基污染,已污染者应停止使用。
9.需要带入无菌室使用的仪器、器械、平皿等一切物品,均应包扎严密,并应用适宜的方法灭菌。
10.供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染。检查前,用70%的酒精棉消毒外表面。
11.无菌间内应保持清洁。操作完毕,应及时清理无菌室,用2%-3%煤酚皂溶液消毒,擦拭工作台面,不得存放与实验无关的物品。再用紫外灯辐照灭菌。需30w紫外灯,距离在1.0m处,照射时间不少于30min,使用紫外灯,应注意不得直接在紫外线下操作,以免引起损伤,灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭,除去上面灰尘和油垢,以减少紫外线穿透的影响。
12.处理和接种食品标本时,进入无菌间操作,不得随意出入,如需要传递物品,可通过小窗传递。
13.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下,取内径90mm的无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml,放至凝固后,倒置于30~36℃培养箱培养48小时,证明无菌后,取平板3~5个,分别放置工作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于30~36℃培养箱培养48小时,取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落,10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度,应对无菌室进行彻底消毒,直至重复检查合乎要求为止。
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